Razširjanje karantenskih patogenov predstavlja veliko tveganje za svetovno pridelavo pridelkov, ogroža zdravje pridelkov in moti agroekosisteme. Pravočasno in natančno-odkrivanje na mestu je ključnega pomena za preprečevanje izbruhov. Rekombinazno polimerazno pomnoževanje (RPA) in večkomponentni DNAzyme (MNAzyme) sta obetavni tehnologiji izotermne detekcije; vendar je njihovo integracijo ovirala zahteva po eno-verižni DNA (ssDNA) za aktivacijo MNAzyme, saj RPA ustvarja dvojno-verižno DNA (dsDNA). Da bi rešili to težavo, smo razvili biosenzor OAR-MNA, inovativno eno-potplatformo, ki povezuje asimetrični RPA (aRPA) z MNAzyme-podprtim ciljnim recikliranjem. Biosenzor smo uporabili za odkrivanje Acidovorax citrulli, povzročitelja bakterijske pegavosti plodov (BFB) v bučnicah. S prilagajanjem koncentracij primerja RPA aRPA ustvari obilo ssDNA, kar omogoča vizualno detekcijo A. citrulli z mejo detekcije 20 kopij/μL in popolno specifičnostjo, ki presega zmogljivost fluorescenčnega RPA. Biosenzor je pokazal 100-odstotno skladnost s qPCR v vzorcih semen in ohranil zanesljivo delovanje v homogenatu melone s kosi. Naša primerjalna analiza je razkrila prednosti sistema OAR-MNA, vključno z nižjimi stroški odkrivanja in izboljšano uporabnostjo na terenu. V kombinaciji s prenosnim analizatorjem DNK zagotavlja biosenzor uporabniku-prijazne rezultate (+/−), zaradi česar je idealen za-uvedbo na mestu. Poleg BFB
odkrivanje, OAR-MNA je bila uspešno uporabljena za odkrivanje virusa kumaričnega zelenega mozaika (CGMMV), karantenskega patogena RNA, ki povzroča resne izgube pri pridelavi kumar. Biosenzor OAR-MNA z omogočanjem zgodnje, natančne -diagnoze na kraju samem predstavlja napredek v tehnologiji za odkrivanje rastlinskih patogenov in ponuja obetavno orodje za varovanje svetovne pridelave pridelkov.






